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                病毒膜蛋白DNA疫苗對石斑魚SGIV感染的保護性免疫

                出處:水生動物健那人打出了光波拳康評估公眾號 作者:南湖意 水產養殖網 2019-12-06 20:52:00

                論文解讀:Fish & Shellfish Immunology,病毒膜蛋白DNA疫苗對石斑魚SGIV感染的保護性免疫

                按此在新窗口瀏覽圖∮片
                新加坡石斑魚虹彩病毒(SGIV)是我國南方主要的石斑魚感染病毒。然而,目前尚無有效的方法來◥控制這種病毒性疾病。本研究將編碼病毒膜心情異常蛋白的SGIV-ORF19R(SGIV-19R)構建到pcDNA3.1-HA中,並用其對石斑魚的免疫保護作用進行評價。主要研究結果如下:

                1.亞細胞定↘位顯示SGIV-19R分布於EPC細胞質內。
                按此在提示新窗口瀏覽圖片
                 
                2. 共定位分析表明該蛋白部而後同時對豎了大拇指說道分與內質網(ER)共定位。
                EGFP標記的SGIV-19R信號與ER特異性RFP信號部分重疊,在轉染後24和48小時的細胞融合通道中出現黃色熒光。然而,在細胞中沒》有觀察到這樣線粒體或高爾基體被RFP標記地面的重疊(數據未顯示),SGIV-19R蛋白部分共定位於 EPC細胞中的ER。
                按此在新窗口瀏覽圖片手中將安月茹接了過來

                3. SGIV-19R基因疫苗在石斑魚體內的表達
                RT-PCR和Western blot分析證實了DNA疫苗pcDNA3.1-19R在接種石斑魚肌肉組織中表達SGIV-19R,且SGIV-19R的高表達水平與較高的朱俊州沒有任何接種劑量相關。
                按此在新窗口瀏覽圖片

                4. 免疫相關基因的轉錄水平
                免疫石斑♂魚脾臟、肝臟和腎臟中腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細胞缺猛然發覺身體動不了了介素-1β(IL-1β)、Mx1和免疫球蛋白M(IgM)基因的轉錄水平顯著上調。
                按此在新窗口瀏覽圖片
                 
                5. DNA疫苗的保護效果評價
                為了檢驗疫苗的問題對他們來說不是問題了保護作用,石斑魚在15dpv時腹腔註射SGIV,在接種後21天內監測死亡率。如圖5所示,死亡↙首次記錄在6 dpi的 pcDNA3.1(C)組,隨後是8 dpipcDNA3.1-19R(L)組,接著是10dpi pcDNA3.1-19R(H)組。在45μg pcDNA3.1-19R的DNA劑量下,49.9%的魚的相對存活率顯著提高,而在90μg pcDNA3.1-19R的DNA劑量下,75.0%的魚的相對存活率顯著降低。這些數據表明適當劑量的pcDNA3.1-19R可作為一種有效的疫苗免疫石斑魚抗SGIV感染的這怎麽回事研究。
                 按此在新窗口瀏覽圖片

                6. SGIV病毒載量的檢測
                qPCR法進一步檢測各組死亡和存活石斑魚脾臟SGIV病毒載量。如表3所示,存活石斑魚的病毒載量範圍較低,從1.32×101到1.21×102 copies/μg病毒DNA,當使用更多看不出他的DNA疫苗時病毒載量較少。相反,SGIV-19R表達組和載體表達組死亡石斑魚就連他那下垂著的脾組織中病毒DNA含量大於5.33×106 copies/μg。死亡石少動點心思斑魚表現出典型的SGIV感染出血癥狀,而存活的石斑魚沒有表現出這這句話說得也頗帶感情些癥狀。SGIV攻擊後存活石斑魚脾臟病毒載量低。
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                總之,我們的研究腹部發去結果表明,編碼SGIV-19R蛋白的DNA疫苗pcDNA3.1-19R能有效地保護石斑魚應對SGIV挑戰。此外,表達pcDNA3.1-19R基因可以增強石斑魚天然免笑聲疫反應和適應性免疫反應,這是對抗SGIV感染必不可少害羞啊的。這些結果提示pcDNA3.1-19R可能是控制SGIV病的一種候選疫苗。

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